液相色譜定量分析原理

液相色譜定量分析原理

在定性的基礎(chǔ)上定量,需有純物質(zhì)作為標準物

液相色譜定量是相對定量的方法:即由已知量的純標樣推算混合物中被測物的量

定量的依據(jù)是:

• 被測組分的量與響應(yīng)值(峰高或峰面積)成正比

• 由已知量的標樣可求得定量校正因子

• 定量校正因子:是定量計算公式中的比例常數(shù),其物理意義是單位響應(yīng)值(峰面積)所代表的被測組分的量

• 測定未知組分的響應(yīng)值,通過定量校正因子即可求得其含量

液相色譜定量分析的步驟

1、選擇一個適合定量分析的色譜方法：

• 確認被檢測組分峰,并達到分離度(R)大于1.5

• 確定被測組分色譜峰的一致性(純度)

• 確定方法的檢測限及定量限;靈敏度及線性范圍

2、用不同濃度的標準樣品建立校正曲線

3、考查定量方法的準確度及精密度

4、用相應(yīng)的色譜管理軟件實施樣品采集,數(shù)據(jù)處理及報告結(jié)果

確認定量峰的一致性

確認色譜峰的一致性(純度)

• 保證每個色譜峰下只有一個被測的組份

• 檢查是否有共流出的物質(zhì)（雜質(zhì)）干擾

色譜峰一致性(純度)確認的方法

• 用光電二極管矩陣(PDA)檢測器比較光譜圖

• 峰純度鑒定

• 2996的純度角理論

常用的定量方法

標準曲線法,分為外標法和內(nèi)標法:

外標法：在液相色譜中用得*多

內(nèi)標法：準確，但是麻煩，在標準方法中用得*多